vspВопросы современной педиатрииCurrent Pediatrics1682-55271682-5535Издательство «ПедиатрЪ»10.15690/vsp.v19i5.2211vsp-2495Research ArticleОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯORIGINAL ARTICLESАбсолютная нейтропения и развитие инфекций в раннем неонатальном периоде у недоношенных новорожденных: одномоментное исследованиеAbsolute Neutropenia and Infection Development in Premature Infants in Early Neonatal Period: Cross-Sectional Studyhttps://orcid.org/0000-0001-8973-7890МухинВ. Е.MukhinVladimir E.

Мухин Владимир Евгеньевич, ведущий аналитик отдела анализа и прогнозирования медико-биологических рисков здоровью

119435, Москва, ул. Погодинская, д. 10, стр. 1

muhinvldmr@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-1339-4155ПанкратьеваЛ. Л.PankratyevaLyudmila L.МилеваО. И.MilevaOlga I.https://orcid.org/0000-0003-0952-2801ЯрцевМ. Н.YartsevMikhael N.https://orcid.org/0000-0002-2667-8229ВолодинН. Н.VolodinNikolay N.Центр стратегического планирования и управления медико-биологическими рисками здоровьюРоссияCentre for Strategic PlanningRussian FederationНациональный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия РогачёваРоссияDmitry Rogachev National Medical Research Center of Pediatric Hematology, Oncology and ImmunologyRussian FederationГородская клиническая больница № 24РоссияCity Clinical Hospital № 24Russian FederationГосударственный научный центр «Институт иммунологии»РоссияState Scientific Center «Institute of Immunology»Russian Federation202024122020195352358Copyright © Мухин В.Е., Панкратьева Л.Л., Милева О.И., Ярцев М.Н., Володин Н.Н., 20202020Мухин В.Е., Панкратьева Л.Л., Милева О.И., Ярцев М.Н., Володин Н.Н.Mukhin V.E., Pankratyeva L.L., Mileva O.I., Yartsev M.N., Volodin N.N.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://vsp.spr-journal.ru/jour/article/view/2495Обоснование

Обоснование. В раннем неонатальном периоде у недоношенных новорожденных отмечается высокий риск развития нейтропении и инфекций. Связь этих событий требует дополнительного изучения.

Цель исследования — изучить частоту случаев абсолютной нейтропении и инфекционных осложнений у недоношенных новорожденных в раннем неонатальном периоде с оценкой фенотипических и функциональных особенностей нейтрофилов пуповинной крови.

Методы

Методы. В исследование включали недоношенных новорожденных (гестационный возраст 25–36 нед) с оценкой по шкале APGAR < 8 баллов на 1-й и 5-й мин жизни. Анализировали частоту случаев абсолютной нейтропении (хотя бы однократно < 1,5109/л) и инфекционных осложнений (локализованные инфекции бактериальной этиологии, ранний неонатальный сепсис) в первые 14 сут жизни. Дополнительно у недоношенных (n = 102) и доношенных новорожденных (n = 30) методом проточной цитофлуорометрии определяли экспрессию нейтрофилами пуповинной крови CD64, CD16, CD32, с использованием FITC-меченых Escherichia coli — их фагоцитарную активность, путем стимуляции нейтрофилов E. coli в присутствии 5 mM дигидрородамина 123 — индекс стимуляции (отношение средней интенсивности флуоресценции, MFI, активированных нейтрофилов в стимулированных образцах и отрицательных контролях, образцы без E. coli).

Результаты

Результаты. В группе недоношенных новорожденных эпизоды абсолютной нейтропении в первые 14 сут жизни зафиксированы в 17 случаях, инфекционные осложнения — у 87 детей (у 24 — сепсис). Частота инфекционных осложнений у недоношенных не ассоциировала с частотой эпизодов абсолютной нейтропении. Нейтрофилы пуповинной крови недоношенных новорожденных отличались более высокой экспрессией CD64 и, напротив, более низкой экспрессией CD16, низкой фагоцитарной активностью и величиной индекса стимуляции (во всех случаях p < 0,001).

Заключение

Заключение. Абсолютная нейтропения в раннем неонатальном периоде у недоношенных новорожденных не ассоциирована с высоким риском бактериальных инфекций. Вместе с тем нейтрофилы пуповинной крови недоношенных новорожденных отличаются более низкой функциональной активностью.

Background

Background. Premature infants have high risk of developing of neutropenia and infections in the early neonatal period. The correlation of these events requires further studies.

Objective

Objective. The aim of the study was to investigate the frequency of absolute neutropenia and infectious complications cases in premature infants in the early neonatal period with estimation of phenotypical and functional features of cord blood neutrophils.

Methods

Methods. The study included premature infants (gestational age 25–36 weeks) with APGAR score < 8 on the 1st and 5th minutes of life. The frequency of absolute neutropenia (at least once < 1.5109/l) and infectious complications (localized infections of bacterial etiology, early neonatal sepsis) cases in the first 14 day of life was analysed. Additionally, we have determined the expression of CD64, CD16, CD32 by cord blood neutrophils in premature (n = 102) and mature infants (n = 30) via method of flow cytofluorometry. We have used FITC labeled Escherichia coli to estimate their phagocytic activity, and stimulation of E. coli neutrophils in the presence of 5 mM of dihydrorhodamine 123 to estimate their stimulation index (ratio of mean fluorescent intensity (MFI) of activated neutrophils in stimulated samples and in negative controls, E. coli free samples).

Results

Results. The episodes of absolute neutropenia in the first 14 days of life were recorded in 17 cases, infectious complications — in 87 children (in 24 cases — sepsis) in the group of premature infants. The frequency of infectious complications in premature children did not correlate with the frequency of absolute neutropenia episodes. Cord blood neutrophils in premature infants had higher CD64 expression and, on the contrary, lower CD16 expression, as well as low phagocytic activity and stimulation index value (in all cases p < 0.001).

Conclusion

Conclusion. Absolute neutropenia in premature infants in early neonatal period does not correlate with high risk of bacterial infections. However, cord blood neutrophils in premature infants had lower functional activity.

абсолютная нейтропениянедоношенныебактериальные инфекцииранний неонатальный периодфагоцитозFc-gamma рецепторыкислородный взрывabsolute neutropeniaprematurebacterial infectionsearly neonatal periodphagocytosisFc-gamma receptorsrespiratory burstНе указанNot specifiedReferencesChow S, Chow R, Popovic M, et al. A Selected Review of the Mortality Rates of Neonatal Intensive Care Units. Front Public Health. 2015;3:225. doi: 10.3389/fpubh.2015.00225.Chow S, Chow R, Popovic M, et al. A Selected Review of the Mortality Rates of Neonatal Intensive Care Units. Front Public Health. 2015;3:225. doi: 10.3389/fpubh.2015.00225.Fleischmann-Struzek C, Goldfarb DM, Schlattmann P, et al. The global burden of paediatric and neonatal sepsis: a systema tic review. Lancet Respir Med. 2018;6(3):223–230. doi: 10.1016/S2213-2600(18)30063-8.Fleischmann-Struzek C, Goldfarb DM, Schlattmann P, et al. The global burden of paediatric and neonatal sepsis: a systema tic review. Lancet Respir Med. 2018;6(3):223–230. doi: 10.1016/S2213-2600(18)30063-8.Yu JC, Khodadadi H, Malik A, et al. Innate Immunity of Neonates and Infants. Front Immunol. 2018;9:1759. doi: 10.3389/fimmu.2018.01759.Yu JC, Khodadadi H, Malik A, et al. Innate Immunity of Neonates and Infants. Front Immunol. 2018;9:1759. doi: 10.3389/fimmu.2018.01759.Lawrence SM, Corriden R, Nizet V. Age-Appropriate Functions and Dysfunctions of the Neonatal Neutrophil. Front Pediatr. 2017;5:23. doi: 10.3389/fped.2017.00023.Lawrence SM, Corriden R, Nizet V. Age-Appropriate Functions and Dysfunctions of the Neonatal Neutrophil. Front Pediatr. 2017;5:23. doi: 10.3389/fped.2017.00023.Lajqi T, Pöschl J, Frommhold D, Hudalla H. The Role of Microbiota in Neutrophil Regulation and Adaptation in Newborns. Front Immunol. 2020;11:568685. doi: 10.3389/fimmu.2020.568685.Lajqi T, Pöschl J, Frommhold D, Hudalla H. The Role of Microbiota in Neutrophil Regulation and Adaptation in Newborns. Front Immunol. 2020;11:568685. doi: 10.3389/fimmu.2020.568685.Rodriguez J, Jordan S, Mutic A, Thul T. The Neonatal Microbiome: Implications for Neonatal Intensive Care Unit Nurses. MCN Am J Matern Child Nurs. 2017;42(6):332–337. doi: 10.1097/NMC.0000000000000375.Rodriguez J, Jordan S, Mutic A, Thul T. The Neonatal Microbiome: Implications for Neonatal Intensive Care Unit Nurses. MCN Am J Matern Child Nurs. 2017;42(6):332–337. doi: 10.1097/NMC.0000000000000375.Ge Y, Gong M, Colliou N, et al. Neonatal intestinal immune regulation by the commensal bacterium, P. UF1. Mucosal Immunol. 2019;12(2):434–444. doi: 10.1038/s41385-018-0125-1.Ge Y, Gong M, Colliou N, et al. Neonatal intestinal immune regulation by the commensal bacterium, P. UF1. Mucosal Immunol. 2019;12(2):434–444. doi: 10.1038/s41385-018-0125-1.Teng RJ, Wu TJ, Garrison R. Early neutropenia is not associated with an increased rate of nosocomial infection in very low-birthweight infants. J Perinatol. 2009; 29(3):219–224. doi: 10.1038/jp.2008.202.Teng RJ, Wu TJ, Garrison R. Early neutropenia is not associated with an increased rate of nosocomial infection in very low-birthweight infants. J Perinatol. 2009; 29(3):219–224. doi: 10.1038/jp.2008.202.Nittala S, Subbarao GC, Maheshwari A. Evaluation of neutropenia and neutrophilia in preterm infants. J Matern Fetal Neonatal Med. 2012;25(Suppl 5):100–103. doi: 10.3109/14767058.2012.715468.Nittala S, Subbarao GC, Maheshwari A. Evaluation of neutropenia and neutrophilia in preterm infants. J Matern Fetal Neonatal Med. 2012;25(Suppl 5):100–103. doi: 10.3109/14767058.2012.715468.Christensen RD, Yoder BA, Baer VL, Snow GL. Early-onset neutropenia in small-for-gestational-age infants. Pediatrics. 2015;136(5): e1259–e1267. doi: 10.1542/peds.2015-1638.Christensen RD, Yoder BA, Baer VL, Snow GL. Early-onset neutropenia in small-for-gestational-age infants. Pediatrics. 2015;136(5): e1259–e1267. doi: 10.1542/peds.2015-1638.Akhil M, Christensen RD. Neutropenia in the neonatal intensive care unit. NeoReviews. 2004;5(10):e431–e443. doi: 10.1542/neo.5-10-e431.Akhil M, Christensen RD. Neutropenia in the neonatal intensive care unit. NeoReviews. 2004;5(10):e431–e443. doi: 10.1542/neo.5-10-e431.Link DC, Kunter G, Kasai Y, et al. Distinct patterns of mutations occurring in de novo AML versus AML arising in the setting of severe congenital neutropenia. Blood. 2007;110(5):1648–1655. doi: 10.1182/blood-2007-03-081216.Link DC, Kunter G, Kasai Y, et al. Distinct patterns of mutations occurring in de novo AML versus AML arising in the setting of severe congenital neutropenia. Blood. 2007;110(5):1648–1655. doi: 10.1182/blood-2007-03-081216.Maheshwari A. Neutropenia in the newborn. Curr Opin Hematol. 2014;21(1):43–49. doi: 10.1097/MOH.0000000000000010.Maheshwari A. Neutropenia in the newborn. Curr Opin Hematol. 2014;21(1):43–49. doi: 10.1097/MOH.0000000000000010.Christensen RD, Colhoun DA, Rimszo LM. A practical approach to evaluating and treating neutropenia in the neonatal intensive care unit. Clin Perinatal. 2000; 27(3):577–601. doi: 10.1016/s0095-5108(05)70040-3.Christensen RD, Colhoun DA, Rimszo LM. A practical approach to evaluating and treating neutropenia in the neonatal intensive care unit. Clin Perinatal. 2000; 27(3):577–601. doi: 10.1016/s0095-5108(05)70040-3.Manzoni P, Farina D, Monetti C. Early-onset neutropenia is a risk factor for Candida colonization in very low-birth-weight neonates. Diagn Microbiol Infect Dis. 2007;57(1):77–83. doi: 10.1016/j.diagmicrobio.2006.10.018.Manzoni P, Farina D, Monetti C. Early-onset neutropenia is a risk factor for Candida colonization in very low-birth-weight neonates. Diagn Microbiol Infect Dis. 2007;57(1):77–83. doi: 10.1016/j.diagmicrobio.2006.10.018.Володин Н.Н., Румянцев А.Г., Щербина А.Ю. Применение ре - комбинантных гранулоцитарных колониестимулирующих факторов у новорожденных. Показания и клинические рекомендации // Вопросы практической педиатрии. — 2012. — Т. 7. — № 4. — С. 44–49.Volodin NN, Rumyantsev AG, Shcherbina AYu. The use of recombinant granulocytic colony-stimulating factors in the neonate. Indications and clinical recommendations. Voprosy prakticheskoy pediatrii = Issues of Practical Pediatrics. 2012;7(4):44–49. (In Russ).Wang Y, Jönsson F. Expression, Role, and Regulation of Neutrophil Fcγ Receptors. Front Immunol. 2019;10:1958. doi: 10.3389/fimmu.2019.01958.Wang Y, Jönsson F. Expression, Role, and Regulation of Neutrophil Fcγ Receptors. Front Immunol. 2019;10:1958. doi: 10.3389/fimmu.2019.01958.Mayadas TN, Cullere X, Lowell CA. The multifaceted functions of neutrophils. Annu Rev Pathol. 2014;9:181–218. doi: 10.1146/annurev-pathol-020712-164023.Mayadas TN, Cullere X, Lowell CA. The multifaceted functions of neutrophils. Annu Rev Pathol. 2014;9:181–218. doi: 10.1146/annurev-pathol-020712-164023.Le Lann L, Jouve PE, Alarcón-Riquelme M, et al. Standardization procedure for flow cytometry data harmonization in prospective multicenter studies. Sci Rep. 2020;10(1):1–8. doi: 10.1038/s41598-020-68468-3.Le Lann L, Jouve PE, Alarcón-Riquelme M, et al. Standardization procedure for flow cytometry data harmonization in prospective multicenter studies. Sci Rep. 2020;10(1):1–8. doi: 10.1038/s41598-020-68468-3.Мухин В.Е., Праулова Д.А., Панкратьева Л.Л., Милева О.И., Румянцев А.Г., Володин Н.Н. Экспрессия Fc-gamma рецепторов нейтрофилов у недоношенных детей различного гестационного возраста // Вопросы современной педиатрии. — 2016. — Т. 15. — № 3. —С. 273–278. doi: 10.15690/vsp.v15i3.1565.Mukhin VЕ, Praulova DА, Pan kratyeva LL, et al. Expression of Fc-Gamma Receptors of Neutrophils in Preterm Infants of Different Gestational Age. Voprosy sovremennoi pediatrii — Current Pediatrics. 2016;15(3):273–278. (In Russ). doi: 10.15690/vsp.v15i3.1565.Неонатология: национальное руководство / под ред. Н.Н. Воло дина. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2009. 848 с. [Neonatologiya: natsional’noe rukovodstvo. Volodin NN, ed. Moscow: GEOTARMedia; 2009. 848 p. (In Russ).]Neonatologiya: natsional’noe rukovodstvo. Volodin NN, ed. Moscow: GEOTARMedia; 2009. 848 p. (In Russ).Urlichs F, Speer CP. Neutrophil function in preterm and term infants. Neoreviews. 2004;5:e417–e429. doi: 10.1016/j.trsl.2017.08.003.Urlichs F, Speer CP. Neutrophil function in preterm and term infants. Neoreviews. 2004;5:e417–e429. doi: 10.1016/j.trsl.2017.08.003.Raymond SL, Mathias BJ, Murphy TJ, et al. Neutrophil chemotaxis and transcriptomics in term and preterm neonates. Transl Res. 2017;190:4–15. doi: 10.1016/j.trsl.2017.08.003.Raymond SL, Mathias BJ, Murphy TJ, et al. Neutrophil chemotaxis and transcriptomics in term and preterm neonates. Transl Res. 2017;190:4–15. doi: 10.1016/j.trsl.2017.08.003.Melville JM, Moss TJM. The immune consequences of preterm birth. Front Neurosci. 2013;7:79. doi: 10.3389/fnins.2013.00079.Melville JM, Moss TJM. The immune consequences of preterm birth. Front Neurosci. 2013;7:79. doi: 10.3389/fnins.2013.00079.Rivas-Fuentes S, García-García E, Nieto-Castañeda G, Rosales C. Fcγ receptors exhibit different phagocytosis potential in human neutrophils. Cell Immunol. 2010; 263(1):114–121. doi: 10.1016/j.cellimm.2010.03.006.Rivas-Fuentes S, García-García E, Nieto-Castañeda G, Rosales C. Fcγ receptors exhibit different phagocytosis potential in human neutrophils. Cell Immunol. 2010; 263(1):114–121. doi: 10.1016/j.cellimm.2010.03.006.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.